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ELISA实验方法之EIA检测过程

ELISA实验方法之EIA检测过程：

EIA检测过程

在试剂制备过程中将试剂置于冰上。建议为所有的标准品和样品设置至少双重复。

向每孔中添加100 μL 抗-“靶标”抗体。室温孵育1.5小时，并轻轻摇晃（1-2圈/秒）。您还可以在4 °C孵育过夜。

弃溶液并用1x 洗涤缓冲液（每孔200-300 μl）洗涤4次，可用多通道移液器或自动化的洗板仪完成洗涤。在每一步都将液体完全去除对于优秀的检测性能至关重要。在完成最后一次洗涤后，通过吸取或倾倒而将残留的洗涤缓冲液进行去除。将平板倒置，并用干净的纸巾将其吸干。

向相应的孔中添加100 μL的每种标准品、阳性对照和样品。确保包含了一个空白孔（仅含检测稀释液）。室温孵育2.5小时，并轻轻摇晃（1-2圈/秒），或4 °C过夜。

弃溶液并按照第3步洗涤4次。

向每孔中添加100 μL制备好的HRP-链霉亲和素溶液。室温孵育45分钟，并轻轻摇晃。建议孵育时间不少于45分钟。

弃溶液并按照第3步洗涤4次。

向每孔中添加100 μL TMB One-Step底物试剂（H项）。室温避光孵育30分钟，并轻轻摇晃（1-2圈/秒）。

向每孔中添加50 μL 终止液（I项）。立即测量450 nm处的吸光度。

电话：400-800-5586