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人间充质干细胞的分化

人间充质干细胞的分化：

间充质干细胞的成骨作用

取用一个人纤连蛋白、20 μg/mL（FC010）或0.1％明胶(ES-006-B) 包被的48孔组织培养板，在0.5 ml常规MSC生长培养基 (SCM015 ｏｒ SCM045)中接种20K细胞/孔。孵育过夜后，用OsteoMAX-XF™分化培养基 (SCM121)更换培养基。每2-3天更换一次培养基，共计14-21天。茜素红（TMS-008）染色的骨细胞将在第7天左右开始形成，在第14天左右达到最大表达。

间充质干细胞的脂肪形成作用

取用一24孔组织培养板，在1 ml常规MSC生长培养基 (SCM015 ｏｒ SCM045)中接种60K细胞/孔。孵育过夜后，用AdipoMAX™分化培养基（SCM122）更换培养基。每2-3天更换一次培养基，共计14-21天。每2-3天更换一次培养基，共计14-21天。油红-O (O1391)染色的脂肪细胞将在第14天左右开始形成，在第21天左右达到最大表达。

间充质干细胞的软骨形成作用

可以使用聚集体中细胞的三维微团培养物诱导间充质干细胞分化成软骨细胞。

在5 mL预热的ChondroMAX™分化培养基（SCM123）中重悬2.5 x 105个MSC。
将细胞以200g离心5分钟。
去除培养基，用0.5 mL预热的ChondroMAX™分化培养基重悬细胞。
将细胞以200g离心5分钟。请勿去除培养基。
拧松管盖以便换气，并在37°C、5％CO2直立孵育。
1-2天后，细胞沉淀团开始形成直径约1-2mm的圆球。每隔一天小心更换培养基，不要破坏细胞的微团块。 21天后，即可固定、切片和用番红-O (TMS-009)、阿尔新蓝（TMS-010）或抗体染色以鉴定软骨细胞。

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