间充质干细胞的扩增                        
                        
                    
                    
                    间充质干细胞的扩增
一旦细胞达到约80%的汇合并且正在积极增殖时,传代培养细胞。
重要提示:在达到100%汇合之前进行传代细胞培养。小心地从含有人间充质干细胞汇合层的10 cm组织培养板中取出培养基。涂抹3-5 mL胰蛋白酶-EDTA溶液 (SM-2003-C),并在37℃培养箱中孵育3-5分钟。
用手掌轻轻拍板的侧面,检查板上的细胞完全脱离。
向板中加入5 mL间充质干细胞扩增培养基 (SCM015 or SCM045)。
轻轻旋转培养板以混合细胞悬液。将解离后的细胞转移到15 mL锥形管中。
将试管以300 × g离心3-5分钟以沉淀细胞。
丢弃上清液。
将含有8 ng/mL FGF-2的2 mL间充质干细胞扩增培养基(预热至37°C)加于锥形管,并彻底重悬细胞。
重要提示:请勿涡旋细胞。使用血细胞计数器计数细胞。
将细胞以5,000-6,000个细胞/cm2的密度接种到含有8 ng/mL FGF-2的间充质干细胞扩增培养基的适当培养瓶、板或孔中。
细胞可以2 × 106个细胞/小管的密度混入MSC生长培养基及10% DMSO(D2650)中冷冻。
电话:400-800-5586
        
        
        
                                                            膜康MOCON                                                        
                                                            默克Merck                                                        
                                                            日立HITACHI                                                        
                                                            艾科琳Airclean                                                        
                                                            赛默飞ThermoFisher                                                        
                                                            毕恩思BIENSI                                                        
                                                            古莎KULZER                                                        
                                                            LAMPLAN                                                        
                                                            迈格MEGA                                                        
                                                            奥德镁QATM                                                        
                                                            徕卡Leica                                                        
                                                            威尔逊Wilson                                                        
                                                            基恩士KEYENCE                                                        
                                                            普兰德Brand                                                        
                                                            CEM                                                        
                                                            维根斯WIGGENS                                                        
                                                            森信SENXIN                                                        
                                                            蔡司Zeiss                                                        
                                                            美国CEM                                                        
                                                            和泰HHitech                                                        
                                                            日本ATAGO                                                        
                                                            杭州彩谱                                                        
                                                            日本KEM                                                        
                                                            上海尧勋                                                        
                                                            浩谱嘉                                                        
                                                            安捷伦Agilent                                                        
                                                            布拉本德Brabender                                                        
                                                            上海屹尧                                                        
                                                            奥豪斯OHAUS                                                        
                                                            宾德BINDER                                                        
                                                            博勒飞Brookfield                                                        
                                                            博迅Boxun                                                        
                                                            苏伊士suez                                                        
                                                            安东帕                                                        
                                                            亚速旺AS ONE                                                        
                                                            埃德伯格                                                        
                                                            BIOBASE                                                        
                                                            众御ZOYET                                                        
                                                            乐普乐吉Looped Logic                                                        
                                                            博科                                                        
                                                            弗霓FU                                                        
                                                            梅特勒Mettler Toledo                                                        
                                                            汉钠HANNA