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间充质干细胞的解冻方法
间充质干细胞的解冻
必须等到准备好推荐的培养基和适当涂有0.1％明胶的塑料培养板和/或玻璃器皿之后才解冻细胞。
从液氮中取出人间充质干细胞（SCC034、SCC038）小管，并在37℃水浴中孵育。密切观察，直到细胞完全解冻。是否获得最大细胞活力取决于冷冻细胞是否快速和完全解冻。
重要提示：请勿涡旋细胞。一旦细胞完全解冻，立即用70％乙醇对小瓶外部进行消毒。立即进行下一步。
在层流罩中，用1或2 mL移液管将细胞转移到无菌的15 mL锥形管中。在转移过程中小心不要引入任何气泡。
用10 mL移液管，缓慢滴加预热至37°C的9 mL间充质干细胞扩增培养基 (SCM015 ｏｒ SCM045)或合适的替代品至15 mL锥形管。
重要提示：请勿将全部培养基一次性添加到培养孔中。由于渗透压冲击，这样做可能导致细胞活力降低。缓慢上下吹吸两次以轻轻混合细胞悬液。小心不要引入任何气泡。
重要提示：请勿涡旋细胞。将试管以300 × g离心2-3分钟以沉淀细胞。
尽可能多地倒出上清液。步骤5-8对于去除残留的冷冻保存剂（DMSO）是必要的。
将细胞重悬于已预热至37°C的总体积为10 mL的间充质干细胞扩增培养基 (SCM015 ｏｒ SCM045) 或合适的替代品中，其中含有新鲜添加的8 ng / mL FGF-2（F0291 ）。
将细胞悬液接种到10 cm组织培养板或T75组织培养瓶上。
重要提示：接种密度应为5,000-6,000个细胞/cm2将细胞置入37℃、用5％ CO2平衡的加湿培养箱中。
第二天，用含有8 ng/mL FGF-2的新鲜间充质干细胞扩增培养基（预热至37℃）更换培养基*。每两至三天更换一次含有FGF-2的新鲜培养基。
当细胞达到大约80％的汇合时，可以用胰蛋白酶-EDTA (SM-2003-C) 将它们分离，并进一步传代或冷冻以备后用。
注意：根据接种密度和传代数（即之后的传代代数），细胞可能需要更长时间才能达到80％的汇合度。电话：400-800-5586
客服小汤：2355607615