细胞计数的方法
在开始实验或生产工艺前,必须对培养细胞进行计数,以监测倍增时间并定量。培养细胞所需的常规监测不仅涉及增殖情况,还涉及活力、细胞毒性和其他细胞健康状况指标。具体测定方法选择取决于培养细胞类型、研究应用和所需的通量。在转染、基因组研究、冻存或其他细胞操作的传代或下游应用之前,培养细胞定量或计数至关重要。
手动细胞计数
细胞计数板(如带有Neubauer网格的血细胞计数板)是手动/目视细胞计数的常用设备。将一小部分细胞悬液上样到网格化的精密磨玻璃设备计数板中,在此通过毛细作用将其分散在蚀刻网格上。在显微镜下观察细胞并手动计数板计数。基于细胞计数板和网格系统的预定义体积,可计算细胞浓度。可使用成像系统自动化处理计数过程。
自动细胞计数
许多自动细胞计数设备使用与血细胞计数板相同的视觉计数染料和原理。与依靠目标识别的自动细胞计数仪不同,Coulter计数设备在实用性和精度方面受到普遍认可。Coulter计数仪借助传感器感应电阻变化,从而检测细胞并对细胞悬浮液计数。此设计更可靠地检测细胞——即使是小型细胞,也可高精度计数。手持式便携型(类似于移液枪)可从直接计数培养罩中的细胞。
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