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高效液相色谱HPLC故障问题排查（八）
高效液相色谱HPLC故障问题排查之八
问题：宽峰
可能的原因：
1、流动相组分发生变化。
2、流动相流速太低。
3、漏液（特别是在色谱柱与检测器之间）。
4、检测器设置不正确。
5、柱外效应：
a.色谱柱过载
b.检测器反应时间或流通池体积过大。
c.色谱柱与检测器之间的管线太长或管线内径太大。
d.记录器响应时间太长。
6、缓冲液浓度太低。
7、保护柱污染/失效。
8、色谱柱污染/失效。
9、色谱柱入口空洞。
10、所出现的峰代表两种或多种解析不良的化合物。
11、柱温过低。
排查方法：
1、重新制备新的流动相。
2、调节流速。
3、检查系统是否有松动的配件。检查泵是否有漏液，是否有盐析出和异常噪音。必要时更换泵密封件。
4、调节设置值。
5、a.注入较小的体积（例如10 μL，而不是 100μL）或以1:10或1:100的比例稀释样品。
b.减少响应时间或使用更小的流通池。
c.在可行的情况下，使用内径为0.007～0.010“的短管。
d.减少响应时间。
6、增加浓度。
7、更换保护柱。
8、换成同类型的新色谱柱。如果新柱未提供窄峰，则冲刷旧柱，然后重新测试。
9、更换色谱柱，或打开入口端填补空洞。
10、更换色谱柱类型，以改善分离效果。
11、提高柱温。除非色谱柱制造商说明可采用更高的温度，否则温度不宜超过75℃。
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