默克色谱柱保护柱套都有哪些使用技巧
默克色谱柱保护柱套为直连无死体积设计,与保护柱芯配合使用。用于防止吸附污染和意外的物理堵塞,从而延长色谱柱的使用寿命;那么它都有哪些使用技巧呢?
1、使用前,放入柱芯后,不要连接色谱柱,直接用流动相冲洗排液2-5分钟,然后连接到色谱柱上使用。此过程使保护柱芯充分活化,起到预饱和排气的作用;
2、预饱和、排气的冲洗排水过程中,如果发现有白色混浊,不用担心,可能是柱芯表面残留的填料排出,几分钟后即可排出冲洗,排出的液体透明、干净;
3、保护柱在使用过程中,如发现峰分叉或一段时间后压力持续升高,应及时更换保护柱芯。更换保护柱芯时,请重复上述步骤2和3。
默克色谱柱使用八大要点:
1、使用新鲜干净的水和乙腈。确保缓冲系统清洁且没有任何污染物。
2、取色谱柱时应避免敲击、跌落。
3、将色谱柱的入口端连接到系统上,不要先连接色谱柱的出口端。色谱柱上有一个箭头指示正确的流向。
4、用纯乙腈以0.1ml/min的流速清洗色谱柱,然后在2分钟内将流速增加到0.5ml/min。
5、当溶剂从默克色谱柱出口均匀流出时,停止流速,将色谱柱出口连接到系统检测器(这样可以防止气泡进入检测系统,快速达到基线平衡)。
6、重新开始流速,按照步骤4中的方法逐渐增加流速至常规分析使用的流速。
7、参考柱效测试报告中的方法,使用此流动相条件平衡色谱柱。一般需要流动相柱体积的5-10倍,直到压力与基线稳定。
8、测试柱效。如果没有柱效测试报告中的分析物,请联系水化学耗材部门寻求支持,并使用合适的浓度和进样量。柱效结果略低于柱效检测报告,属正常现象。如果结果明显偏低,峰形拖尾,说明所用的色谱柱和/或液相系统处于不理想状态,需要进行故障排除。