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白蛋白在细胞培养中的应用

白蛋白在无血清真核细胞培养中的重要性和应用,包括杂交瘤细胞和中国仓鼠卵巢(CHO)细胞培养

白蛋白是一种无血清培养基添加剂 ,适用于生物制造、组织工程学和特殊培养基

白蛋白用于治疗性单克隆抗体和重组蛋白质的生物制造。它们是许多无血清 细胞培养系统的重要组分,例如杂交瘤细胞和中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的培养系统。并非所有白蛋白在培养基中都具有相同的效力。白蛋白活性的主要控制因素包括分子相关特异性配体的质量和相对数量。白蛋白相关配体很大程度上取决于来源动物的营养状态和纯化过程。因此,指定细胞培养系统中的白蛋白可能具有不同的有效性并且必须对其进行控制。配体分析也有助于说明为什么来源于人类(HSA)或牛(FBS)血清的天然白蛋白与重组蛋白在细胞培养中具有不同的效力。

HSA或FBS来源蛋白的潜在污染,如含外源性制剂的白蛋白,是许多生物制造商担心的问题。牛白蛋白的潜在疯牛病(BSE)病毒污染,迫使许多公司尝试避免使用白蛋白以及其他动物源性蛋白质。这促成了无动物源成分 (ACF)培养基的出现。 这是一个取舍问题,应认真权衡在培养基中使用白蛋白的优势及污染风险。

下文列出了白蛋白添加剂的一些优势。这些内容有助于说明白蛋白是对细胞培养具有重要价值的少数蛋白之一。

细胞培养皿

白蛋白在细胞培养系统中的首要功能

许多体外发现的分子在处于非复合形式时是不稳定或具有毁灭性的。白蛋白的一个主要功能是结合、隔离和稳定一些重要的小分子和离子。在体外,白蛋白是一种多功能的抗氧化剂,其总体抗氧化活性是由多种独立的抗氧化活性组合而成。白蛋白可结合脂肪酸并防止其发生氧化;结合铜并阻止其参与氧化反应;结合半胱氨酸和谷胱甘肽并防止它们发生氧化;结合胆红素和吡哆醛-5’-磷酸盐并防止它们发生氧化;因此,白蛋白是一种牺牲性抗氧化剂。

白蛋白的化学特性使其成为一种有用的无血清培养基添加剂:

白蛋白是一种高度可溶的、分子量为69 kDa的酸性蛋白质。它能够结合阴离子、阳离子和中性分子。白蛋白对许多分子都具有高亲和力和二级结合位点。与白蛋白一级位点结合的配体通常无反应活性,而与二级位点结合的配体通常有反应活性。

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