防止和消除细胞培养污染的一般技巧
在生物安全柜内工作
在生物安全柜内工作时,记住气流是帮助维持无菌环境的关键,这一点很有帮助。后方和前方通风口应始终保持畅通,以获得有效的气流。在进行任何实际操作之前,应在机柜中放置所有必需的材料,以尽量减少操作员袖子和手上污染物转移的可能性。
在将待用物品放入机柜之前,至少将气流打开20分钟。放入机柜的所有物品必须先喷洒70%(v/v)无菌酒精,然后用无绒布擦拭,以防止灰尘和微粒进入机柜。在打开任何顶部或容器之前确保气流良好,使气流可吹扫到可能已经进入工作区域的颗粒。
移液和气溶胶的预防
一次性塑料移液管——也称为血清移液管,容量为1-100 mL——是细胞培养不可或缺的工具。这些必须单独包装,确保无菌。遵守以下指导可最大限度地减少与移液相关的污染和安全风险。
使用自动移液器辅助装置,每个移液器辅助装置限制在单个机柜中使用。 为避免污染,请定期拆卸移液器辅助部件并消毒。确保移液器辅助装置的过滤器储存良好并定期更换。
尽可能使用堵塞的移液器(顶部用棉花塞住),特别是在转移介质时。 避免将液体吸入移液器塞。如果塞子意外弄湿,请立即更换移液器过滤器。
展开一部分,将血清移液管末端安装到移液器辅助装置,然后取下纸套,从而避免接触移液管。
为避免产生污染性气溶胶,请勿在培养基或移液器中产生气泡。
消毒
设计用于培养废物、工作台和设备的消毒/净化的方法不仅须使污染风险降至最低,而且对实验室人员必须安全。使用浓缩的消毒剂时,请始终穿戴合适的个人防护装备(PPE),如手套和护目镜。选择的手套应防处理的物质。制造商的图表有助于确定给定任务的最佳手套。主要消毒剂的分组及其相对优点可归纳如下:
次氯酸钠或漂白剂
良好的通用消毒剂
可抗病毒
对金属具有腐蚀性—不得用于金属表面(如离心机)
易被有机物灭活,应经常制备新鲜溶液
使用商业漂白剂在废液中形成10%(v/v)溶液或进行表面消毒
酒精(如乙醇、异丙醇)
有效浓度:乙醇为70%,异丙醇为60-70%
对细菌有效。乙醇对绝大多数病毒有效,但对无包膜病毒无效
异丙醇对病毒无效
醛是刺激物,其使用应有限
酚类消毒剂不支持作为欧盟生物杀灭剂产品指令审查计划的一部分,应避免使用。
电话:400-800-5586
膜康MOCON
默克Merck
日立HITACHI
艾科琳Airclean
赛默飞ThermoFisher
毕恩思BIENSI
古莎KULZER
LAMPLAN
迈格MEGA
奥德镁QATM
徕卡Leica
威尔逊Wilson
基恩士KEYENCE
普兰德Brand
CEM
维根斯WIGGENS
森信SENXIN
蔡司Zeiss
美国CEM
和泰HHitech
日本ATAGO
杭州彩谱
日本KEM
上海尧勋
浩谱嘉
安捷伦Agilent
布拉本德Brabender
上海屹尧
奥豪斯OHAUS
宾德BINDER
博勒飞Brookfield
博迅Boxun
苏伊士suez
安东帕
亚速旺AS ONE
埃德伯格
BIOBASE
众御ZOYET
乐普乐吉Looped Logic
博科
弗霓FU
梅特勒Mettler Toledo
汉钠HANNA