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高效液相色谱HPLC故障问题排查（六）

高效液相色谱HPLC故障问题排查之六

问题：基线漂移

可能的原因：

1、柱温波动。（即使很小的温度变化都会引起基线波动。通常会影响折光率和电导率检测器、高灵敏度的UV检测器或间接光度模式。）

2、流动相不均匀。（通常漂移到更高的吸光度，而不是温度波动的循环模式。）

3、检测器流通池中有污染物或气体积聚。

4、检测器出口管路阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生基线噪音。）

5、流动相混合问题或流速变化。

6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时。

7、流动相污染、变质或未由优质化学品制备。

8、样品中的强保留物质（高K’值）可以极宽峰洗脱，表现出逐步升高的基线。（梯度分析会使问题加剧。）

9、检测器（UV）未设置在最大吸光度处，而是设置在曲线斜坡处。

排查方法：

1、控制色谱柱和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器。

2、使用HPLC级的溶剂、高纯度盐和添加剂。在使用前进行流动相脱气，在使用过程中喷氦气。

3、用甲醇或其他强溶剂冲洗流通池。如果必要，可以用1N HNO₃清洁流通池（切勿使用HCl，切勿对PEEK管或配件使用硝酸）。

4、拔下或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。

5、更正组分 / 流速。为避免这个问题，可定期检查流动相组分及流速。

6、用中等强度的溶剂冲洗色谱柱，在分析前用10-20倍柱体积的新流动相对冲洗色谱柱。

7、检查流动相的组成。

8、使用保护柱。如有必要，在两次进样之间，或在分析过程中定期，用强溶剂冲洗色谱柱。

9、将波长调整至最大UV吸光度处。

基线漂移

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