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高效液相色谱HPLC故障问题排查（五）

高效液相色谱HPLC故障问题排查之五

问题：峰拖尾

可能的原因：

1、保护柱或分析柱污染 / 失效。

2、流动相污染 / 变质。

3、样品中有干扰组分。

排查方法：

1、取下保护柱（如果有）进行分析。必要时更换保护柱。如果问题源于分析柱，则运用适当的再生程序。如果问题仍然存在，则更换色谱柱。

2、检查流动相的组成。

3、用标样检查色谱柱性能。

问题：前伸峰

可能的原因：

1、色谱柱过载。

2、样品溶剂与流动相不相容。

3、在主峰之前出现肩峰或基线逐渐上升可能是因为存在其他样品成分造成。

排查方法：

1、注入较小的体积（例如10 μL，而不是 100 μL）。在质量过载的情况下，以1:10或1:100的比例稀释样品。

2、调节溶剂。尽可能在流动相中注入样品。用50倍柱体积的HPLC级乙酸乙酯以2-3倍标准流速冲洗极性键合相柱，然后在分析前用中等极性溶剂冲洗。

3、提高效率或改变系统选择性以提高解析度。如有必要，尝试其他色谱柱类型（例如从非极性C18更换为极性氰基相）。

问题：圆弧形峰

可能的原因：

1、检测器在线性动态范围外工作。

2、记录器增益设置太低。

3、色谱柱过载。

4、样品与色谱柱发生反应。

5、检测器和 / 或记录器时间常数设置太高。

排查方法：

1、降低样品量和 / 或降低浓度。

2、调节增益。

3、注入较小的体积（例如10 μL，而不是 100μL）或以1:10或1:100的比例稀释样品。

4、改变缓冲液强度、pH值或流动相组分。如有必要，提高色谱柱温度或改变色谱柱类型。（溶质结构分析可能有助于预测相互反应。）

5、将设置降至最低值或不再产生进一步改善的值。

网址：www.pschina.com.cn

电话：400-800-5586

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