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紫外可见分光光度计分析误差如何避免
  一、杂散光的重要性




  杂散光是紫外可见分光光度计非常重要的关键技术指标。它是紫外可见分光光度计分析误差的主要来源,它直接限制被分析测试样品浓度的上限。当一台紫外可见分光光度计的杂散光一定时,被分析的试样浓度越大,其分析误差就越大。astm认为:“杂散光可能是光谱测量中主要误差的来源。尤其对高浓度的分析测试时,杂散光更加重要”。有文献报道,在紫外可见光区的吸收光谱分析中,若仪器有1%的杂散光,则对2.0a的样品测试时,会引起2%的分析误差时,说明仪器中有这种杂散光存在。但必须注意,当仪器存在零点误差时,有可能造成混淆。如果在不透明的样品上涂上白色,则可增加样品本身反射和散射的效果,可以提高测量灵敏度。第二种形式是指测试波长以外的、偏离正常光路而到达光电转换器的光线。它通常是由光学系统的某些缺陷所引起的。如光学元件的表面被擦伤、仪器的光学系统设计不好、机械零部件加工不良,使光路位置错移等。

  杂散光对分析测试结果的误差影响是随着吸光度值增大而增大的。因此,吸光度值越大,对误差的影响也越大。

  二、杂散光的来源

  产生杂散光的原因很多,其最主要的原因大致有以下9个方面:

  ①灰尘沾污光学元件(如光栅、棱镜、透镜、反射镜、滤光片等)。

  ②光学元件被损伤,或光学元件产生的其他缺陷(如光栅、透镜、反射镜、棱镜材料中的气泡等)。

  ③准直系统内部或有关隔板边缘的反射。

  ④光学系统屏蔽不好。

  ⑤热辐射或荧光引起的二次电子发射。

  ⑥狭缝的缺陷。

  ⑦光束孔径不匹配。

  ⑧光学系统的像差。

  ⑨单色器内壁黑化处理不当。

  以上9个方面中,光栅是杂散光的主要来源。它产生的杂散光占总杂散光的80%以上。

  三、杂散光的测试方法

  目前,测试杂散光常用的方法是所谓“截止滤光法”(thecutofffiltermethod)或称作“滤光片法”(thefiltermethod)。主要是采用滤光片或滤光液来测试紫外可见分光光度计的杂散光。有时也采用he-ne激光器的632.8nm来测试杂散光。具体做法是在离632.8nm±5nm处进行测试,测出的数值与632.8nm相比就是杂散光。“截止滤光法”的具体测试方法:仪器冷态开机,预热0.5h,如用“滤光片法”测试,则参比为空气;如用滤光液来测试,则参比为溶剂(若用nai、nano2水溶液,则参比为蒸馏水)。设置仪器的纵坐标为%t,横坐标为波长nm),用滤光液时,试样比色皿中装滤光液,参比比色皿中装溶解液,将波长调到相应的波长上(nai为220nm、nano2为340nm)进行测试。


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